移植/誘導(dǎo)成瘤模型


腫瘤細(xì)胞荷瘤模型(CDX)

原理

將腫瘤細(xì)胞接種免疫缺陷小鼠,從而制作小鼠荷瘤模型

樣本

南模生物熒光標(biāo)記細(xì)胞系列表? ?點(diǎn)擊查看

南模生物可使用的野生型細(xì)胞系列表(不可單獨(dú)出售)點(diǎn)擊查看

受體

Balb/c裸鼠,NOD/SCID或其他免疫缺陷小鼠,例如:Rag1敲除免疫缺陷小鼠(NM-KO-00069)Rag2敲除免疫缺陷小鼠(NM-KO-00070)、重癥免疫缺陷(M-NSG)小鼠等。查看更多免疫缺陷小鼠品系

服務(wù)周期視細(xì)胞系而定。

技術(shù)指標(biāo)

檢測(cè)服務(wù)包括腫瘤生長(zhǎng)曲線(xiàn)、體重曲線(xiàn)、生化指標(biāo)、病理檢測(cè)和mRNA、蛋白水平檢測(cè)

已驗(yàn)證模型列表

皮下接種模型

細(xì)胞系

名稱(chēng)

細(xì)胞接種量

成瘤時(shí)間

MSTO-211H

人間皮瘤細(xì)胞株

5*106

1周

A549

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

5*106

1周

B16

小鼠黑色素瘤細(xì)胞

5*105

1周

Sp2/0

小鼠骨髓瘤細(xì)胞

5*106

1周

HL-60

人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞

5*106

1周

HelaLuc/Smoc

熒光素酶標(biāo)記人宮頸癌細(xì)胞

5*106

3周

SH-SY5YLuc/Smoc

熒光素酶標(biāo)記人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

1*107

3周

HepG2Luc/Smoc

熒光素酶標(biāo)記人肝癌細(xì)胞

5*106

1周

MDA-MB-231Luc/Smoc

熒光素酶標(biāo)記人乳腺癌細(xì)胞

1*107

3周

MGC803

人胃癌細(xì)胞

1*107

1周

SPC-A-1

肺腺癌

5*106

1周

Aspc-1

胰腺癌

1*107

1周

skov3

移卵巢癌

1*107

1周

HO-8910PM

高轉(zhuǎn)移卵巢癌

1*107

1周

HT-29

人結(jié)腸癌細(xì)胞

5*106

1周


轉(zhuǎn)移模型

細(xì)胞系

名稱(chēng)

細(xì)胞接種量

成瘤時(shí)間

A549

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

5*106

6-8周

NCI-H1299

非小細(xì)胞肺癌

5*106

6-8周

NCI-H1975

肺腺癌

5*106

6-8周

B16

小鼠黑色素瘤細(xì)胞

5*105

4-8周


實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)舉例

活體成像CDX腫瘤模型

帶有 Luciferase 熒光標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞系可用于構(gòu)建各類(lèi)皮下,原位或轉(zhuǎn)移型的 CDX 腫瘤模型。Luciferase 報(bào)告基因系統(tǒng)以熒光素(luciferin)為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)熒光素酶(firefly luciferase)的活性,其優(yōu)點(diǎn)是可以在小鼠存活的情況下反復(fù)測(cè)量,分析不同時(shí)間點(diǎn)的熒光變化,以此來(lái)示蹤腫瘤細(xì)胞的增殖與轉(zhuǎn)移。

圖1-A.png

圖1-b-c.png

圖1-D.png

圖 1. A–B. 基于人結(jié)腸癌細(xì)胞系的顱內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤模型。向裸鼠頸動(dòng)脈注射不同接種量的,帶有 Luciferase 熒光標(biāo)記的人結(jié)腸癌細(xì)胞,并選取多個(gè)時(shí)間點(diǎn)通過(guò)活體成像術(shù)檢測(cè)Luciferase 在顱內(nèi)的表達(dá)水平。C. 基于A549Luc 細(xì)胞的原位CDX 腫瘤模型。Balb/C 裸鼠提前經(jīng)氣管插管注射生理鹽水(NS)或博來(lái)霉素(誘導(dǎo)肺纖維狀損傷以促使外源細(xì)胞成瘤)處理,飼養(yǎng)兩周后再經(jīng)氣管插管注射 1×106個(gè) A549Luc 細(xì)胞,繼續(xù)飼養(yǎng)一周后進(jìn)行活體成像,檢查肺部成瘤情況。D. 基于熒光標(biāo)記B16Luc 黑色素瘤細(xì)胞的皮下 / 轉(zhuǎn)移瘤模型。

裸鼠 HepG2 細(xì)胞皮下成瘤模型

實(shí)驗(yàn)室中常用的移植型肝癌模型根據(jù)其移植瘤所在部位可以分為原位型和異位型。異位型常通過(guò)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的皮下注射肝癌細(xì)胞形成腫瘤。皮下成瘤實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單,成功率高,且腫瘤體積變化易于測(cè)量,方便給予局部干預(yù)。

圖2.png

圖 2. 裸鼠皮下注射 HepG2 細(xì)胞 4 周后腫瘤形成圖。

圖片3-1.png

圖 3.? HepG2 皮下成瘤的組織學(xué)分析。正常的小鼠肝臟組織細(xì)胞(左)呈放射狀排列,細(xì)胞輪廓清晰,胞核圓形居中,肝小葉結(jié)構(gòu)清晰, 組織結(jié)構(gòu)形態(tài)正常;HepG2 皮下接種形成的腫瘤組織中,細(xì)胞排列無(wú)序,胞核不清,可見(jiàn)空泡樣變性結(jié)構(gòu),肝小葉結(jié)構(gòu)消失組織結(jié)構(gòu)呈不規(guī)則細(xì)胞團(tuán),符合腫瘤組織結(jié)構(gòu)特征。

基于 M-NSG? 重度免疫缺陷小鼠的 CDX 模型構(gòu)建

南模生物自主研發(fā)的 M-NSG 小鼠,在 NOD-scid 品系的基礎(chǔ)上進(jìn)一步敲除了 Il2rg 基因。該小鼠表現(xiàn)為嚴(yán)重免疫缺陷,同時(shí)缺失成熟的 B,T 和 NK 細(xì)胞,可高效地植入人 CD34+ 造血干細(xì)胞(HSC),外周血單核細(xì)胞(PBMC)或成體干細(xì)胞和組織。M-NSG 小鼠是異種移植和免疫重建的完美載體,對(duì)于構(gòu)建同種或異種腫瘤移植模型具有重大意義。

圖4.png

圖 4. A549 細(xì)胞皮下成瘤實(shí)驗(yàn)。3×106 A549 細(xì)胞以皮下注射的形式接種到野生型 C57BL/6,Balb/c Nude,NOD-scid 和 M-NSG 小鼠中,在不同的時(shí)間點(diǎn)測(cè)量成瘤體積。

人源細(xì)胞系 A549 和 MSTO-211H 介導(dǎo)的皮下成瘤模型及后續(xù)的藥效學(xué)研究

向裸鼠體內(nèi)以皮下注射的方式接種 2×106? A549 細(xì)胞(A&B)或者 MSTO-211H 細(xì)胞(C&D),并隨后注射抗腫瘤藥物 D1或 D2。在不同的時(shí)間點(diǎn)測(cè)量成瘤體積(A&C)及小鼠體重(B&D)。結(jié)果顯示,抗腫瘤藥物 D1 和 D2 具有明顯的抗癌協(xié)同功效。(E)免疫組化檢測(cè) MSTO-211H 細(xì)胞形成的腫瘤組織中 VEGF 蛋白的表達(dá)水平??鼓[瘤藥物治療顯著降低了腫瘤組織中標(biāo)記物 VEGF 的表達(dá)。(F)利用穩(wěn)定表達(dá) GFP 蛋白的人 A549 細(xì)胞 A549GFP 細(xì)胞追蹤腫瘤皮下生長(zhǎng)。

圖5.png


了解更多CDX模型信息與服務(wù)細(xì)節(jié),請(qǐng)來(lái)電咨詢(xún),或聯(lián)系在線(xiàn)客服。技術(shù)熱線(xiàn):400-728-0660

也可以進(jìn)入資源與支持菜單-產(chǎn)品手冊(cè),索取電子版資料。

肝癌病人來(lái)源異種移植模型(PDX)

病人來(lái)源腫瘤異種動(dòng)物模型(PDX)是用于新藥研發(fā)最先進(jìn)的臨床前腫瘤學(xué)模型。相比傳統(tǒng)細(xì)胞系異種動(dòng)物模型,它能提供更好的臨床前藥物療效測(cè)試及分析。


優(yōu)勢(shì):

  • PDX保存了病人腫瘤組織的基因型和表型的多樣性,比較真實(shí)的反映原始腫瘤的特性

  • PDX保存了腫瘤的基質(zhì)細(xì)胞,保存了腫瘤的微環(huán)境

  • 相比于腫瘤細(xì)胞系,PDX的研究結(jié)果能更準(zhǔn)確地反映病人腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制

  • 相比于腫瘤細(xì)胞系,PDX藥物篩選結(jié)果,能更好地反映腫瘤病人的藥物敏感性和耐受性


應(yīng)用于:

  • 抗癌藥物的篩選與生物標(biāo)志物的研發(fā)

  • 腫瘤藥物協(xié)同臨床試驗(yàn)

  • 精準(zhǔn)醫(yī)療

  • 腫瘤機(jī)理研究


PDX構(gòu)建流程:

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可提供的PDX服務(wù):

  • 自主生產(chǎn)的免疫缺陷M-NSGTM?小鼠提供PDX移植受體

  • 成熟的皮下和器官接種技術(shù)保證F0 PDX構(gòu)建與傳代擴(kuò)增

  • 病理和分子生物學(xué)技術(shù)保障PDX的鑒定

  • 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)保證PDX的長(zhǎng)期凍存


肝癌PDX資源情況:

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肝癌PDX藥物篩選結(jié)果示意圖:

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圖1. 南模生物肝癌PDX不同藥物配伍治療后腫瘤生長(zhǎng)曲線(xiàn)


南模生物已成功建立超過(guò)60種的肝癌PDX,并已通過(guò)分析其基因譜表達(dá)水平,病理組織結(jié)構(gòu),成長(zhǎng)特征和標(biāo)準(zhǔn)療法的藥物反應(yīng)等鑒定其特性。

我們的研究顯示PDX成功從各方面復(fù)制病人腫瘤的異質(zhì)性,包括其分子層面, 基因?qū)用婧徒M織層面上的復(fù)雜性。我們提供的PDX腫瘤移植系列,讓您能夠在不同的臨床背景下為藥物療效及分析作出快速測(cè)試。同時(shí),從我們的PDX收集得的PDX腫瘤亦可以用于臨床前測(cè)試,通過(guò)模擬第二期臨床試驗(yàn)中癌癥病人的規(guī)模,以幫助藥物開(kāi)發(fā)。

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DEN誘導(dǎo)原發(fā)性肝癌模型

原理

二乙基亞硝胺(Diethylnitrosamine,DEN)是肝癌的致癌劑,幼鼠腹腔注射后約6個(gè)月可建立原發(fā)性肝癌模型。

樣本要求

雄性C57小鼠周齡16天

服務(wù)周期

6個(gè)月

技術(shù)指標(biāo)

1)血清檢測(cè):生化(ALT、AST、HA、ALB) ;

2)病理檢測(cè):HE、MASSON染色;

3)mRNA水平檢測(cè):Real-time PCR;?

4)蛋白水平檢測(cè):Western blot 、FACS;

5)死亡率:幼鼠腹腔注射DEN后,有較高的死亡率




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