Myc條件性過表達(dá)自發(fā)腫瘤小鼠模型
c-Myc基因(也叫Myc)在許多腫瘤中存在著異常表達(dá),影響細(xì)胞增殖、生長代謝、基因的不穩(wěn)定性、刺激血管生成、細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化、分化及調(diào)亡中起著極為重要的調(diào)節(jié)作用。
利用Crispr技術(shù),將CAG promoter-loxp-STOP-loxp-Myc-polyA條件性過表達(dá)結(jié)構(gòu)插入到H11位點,建立H11-LSL-Myc小鼠模型。H11位點位于小鼠11號染色體,該位點已被證明與Rosa26類似,可用于較為廣泛地表達(dá)外源基因。H11-LSL-Myc可在與Cre工具鼠交配后,在Cre表達(dá)的組織中高表達(dá)Myc基因。進(jìn)入訂購頁面
例如: 與Alb-cre小鼠交配后,可在2月齡時自發(fā)肝癌??捎糜谀[瘤模型的建立與腫瘤研究中。
Figure 1. Schematic diagram of H11-LSL-Myc knockin cassette.?
MycLSL;Alb-Cre小鼠表型分析完整數(shù)據(jù)
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Figure2:#79與#88小鼠合影
#88為Alb-Cre小鼠,腹部平坦,腹腔未見明顯腫脹等異?,F(xiàn)象;#79為MycLSL;Alb-Cre小鼠,腹部膨隆,表面不平,腹腔內(nèi)可見明顯團(tuán)塊狀物體充盈。
肝臟組織HE染色結(jié)果
Figure3:#79和#88小鼠肝臟組織學(xué)結(jié)果
#88小鼠的肝臟組織肝細(xì)胞呈放射狀排列,細(xì)胞輪廓清晰,胞核圓形居中,肝小葉結(jié)構(gòu)清晰,組織結(jié)構(gòu)基本正常;#79小鼠的肝臟組織細(xì)胞排列無序,胞核不清,可見空泡樣變性結(jié)構(gòu),肝小葉結(jié)構(gòu)消失,組織結(jié)構(gòu)呈不規(guī)則細(xì)胞團(tuán),符合腫瘤組織結(jié)構(gòu)特征。
肝臟組織Ki67IF染色結(jié)果
Figure4:#79和#88小鼠肝臟Ki67表達(dá)結(jié)果
#88小鼠的肝臟組織有散在的Ki67陽性細(xì)胞,提示肝臟組織少量細(xì)胞有分裂增殖;#79小鼠的肝臟組織有大量的Ki67陽性細(xì)胞,提示肝組織的細(xì)胞分裂增殖旺盛,符合腫瘤組織的特性。
Figure5 活體成像檢測荷瘤小鼠(野生型B6小鼠接種了H11-LSL-Myc; Rosa26-LSL-Luc-EGFP; Alb-Cre三陽性小鼠自發(fā)肝癌瘤塊)的luciferase的表達(dá)情況。隨著時間推移,熒光強度隨著腫瘤增大而逐漸增強。
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