iPSC 體外疾病模型研究平臺上線啦


誘導(dǎo)性多能干細胞(iPS)具有類似于胚胎干細胞的全能性,其能夠分化成特定的細胞,組織或器官。誘導(dǎo)多能干細胞 iPS 技術(shù)具有巨大的潛在應(yīng)用價值,可以用于干細胞治療研究,構(gòu)建疾病模型,發(fā)現(xiàn)新的治療靶點或篩選新的藥物。南模生物 iPS 疾病研究模型平臺擁有多年培養(yǎng)干細胞的經(jīng)驗和干細胞基因編輯技術(shù),已建立穩(wěn)定的iPS誘導(dǎo)系統(tǒng),可以提供高效的疾病研究模型。

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1.?iPSC 體外疾病模型的優(yōu)勢

1. 體外誘導(dǎo)的 iPSC 細胞可無限擴增和定向分化,有利于替代較難獲得的原代細胞系。

2. 患者體內(nèi)誘導(dǎo)出來的 iPSC 細胞,分化形成的類器官,有利于大規(guī)模的進行藥物篩選。

3. iPSC 細胞在體外更容易進行基因編輯,誘導(dǎo)分化細胞可以高效模擬疾病的治療。


2. iPSC 體外疾病模型服務(wù)內(nèi)容及交付周期

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3. iPSC 體外疾病模型服務(wù)案例

3.1外周血單核細胞重編程為誘導(dǎo)多能干細胞(iPS)

通過密度梯度離心,將外周血中的單個核細胞分離出來。單個核細胞經(jīng)體外擴增后,電轉(zhuǎn)重編程質(zhì)粒 OCT3/4,SOX2,KLF4,L-MYC,LIN28。電轉(zhuǎn)第七天可見細胞貼壁,12-18 天 iPS 克隆逐漸形成,qPCR 驗證 iPS細胞相關(guān)基因均有表達。

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注:A圖為紅系祖細胞重編程打靶day0;B圖為day7,細胞開始貼壁;C圖為day12,iPS克隆開始出現(xiàn);D圖為day18,iPS克隆長成,邊緣清晰,細胞致密。


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qPCR?驗證iPS細胞相關(guān)基因均有表達


3.2?iPS細胞和人胚胎干細胞的基因編輯

敲除示例:在基因CISH第三個外顯子內(nèi)選取sgRNA進行基因編輯,移碼突變造成CISH基因的敲除。

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hiPSC-CISH-KO編輯方案


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hiPSC-CISH-KO測序驗證


敲入示例:在人iPS細胞 NANOG基因后插入TdTomato熒光蛋白。

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iPS-NANOG-2A-tdTomato編輯方案


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iPS-NANOG-2A-tdTomato熒光表達驗證


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