EMT6-hPD-L1細胞是一個表達人源PD-L1蛋白的人源化EMT6小鼠乳腺癌細胞系。流式細胞術(shù)檢測結(jié)果顯示，在該細胞系中，人源PD-L1蛋白有較強的表達，鼠源Pd-l1蛋白沒有表達。小鼠的皮下成瘤實驗表明，該細胞系與野生型EMT6細胞系成瘤性無顯著性差異，但是，成瘤后瘤內(nèi)細胞人源PD-L1蛋白沒有表達，故該細胞系只能用于細胞水平驗證實驗，無法用于體內(nèi)驗證實驗。

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1.?EMT6-hPD-L1人源化細胞系人源、鼠源PD-L1蛋白表達檢測

流式細胞術(shù)檢測EMT6-hPD-L1細胞系中人源PD-L1和鼠源PD-L1蛋白的表達，流式檢測結(jié)果顯示，EMT6-hPD-L1細胞系中僅能檢測到人源PD-L1蛋白的表達，沒有鼠源PD-L1蛋白的表達，結(jié)果如圖2所示。

圖1. 流式細胞術(shù)檢測EMT6-hPD-L1細胞系人源PD-L1和鼠源PD-L1的表達。EMT6.WT為野生型EMT6細胞系對照，EMT6-hPD-L1-2#為EMT6-hPD-L1細胞系的2#克隆。

2.?成瘤性驗證

為了探究EMT6-hPD-L1細胞系的成瘤能力，在BALB/c小鼠皮下分別接種相同數(shù)量的野生型EMT6和EMT6-hPD-L1細胞系，對兩種細胞系的成瘤能力進行比較。結(jié)果顯示兩種細胞系在成瘤性和腫瘤的生長速度方面上沒有顯著差異，結(jié)果如圖3所示。

圖 2. 野生型EMT6細胞系和PD-L1人源化EMT6細胞系皮下接種后的腫瘤生長曲線。每只小鼠皮下接種5E5個細胞，腫瘤生長曲線從接種后的第7天開始記錄。Wild type EMT6為野生型EMT6細胞系對照，EMT6-hPD-L1（10#）為EMT6-hPD-L1細胞系的10#克隆。

3.?EMT6-hPD-L1細胞系腫瘤中人源PD-L1蛋白表達檢測

為了進一步驗證EMT6-hPD-L1細胞系成瘤后人源PD-L1蛋白的表達，通過流式細胞術(shù)對兩種細胞系成瘤后腫瘤細胞中鼠源及人源PD-L1蛋白的表達進行了檢測。結(jié)果顯示：人源化PD-L1的EMT6細胞系成瘤后，腫瘤細胞既不表達人源PD-L1蛋白，也不表達鼠源的PD-L1蛋白。也即該細胞系只能用于細胞水平驗證實驗，無法用于體內(nèi)驗證實驗。結(jié)果如圖4所示。

圖3: 流式細胞術(shù)檢測野生型EMT6和EMT6-hPD-L1細胞系成瘤后腫瘤細胞鼠源PD-L1和人源PD-L1蛋白表達。