APOE基因編碼一個稱為apoE的脂蛋白元（apolipoprotein)，主要在肝臟和大腦中表達(dá)，主要功能是參與膽固醇的吸收，合成和分配。APOE基因有三種常見的變異型，分別是E2, E3和E4變異型，互相之間，僅有一個核苷酸的區(qū)別，目前已確認(rèn)APOE基因E4變異是最主要的老年癡呆癥風(fēng)險變異。研究發(fā)現(xiàn)攜帶一條E4變異的人群，罹患老年癡呆癥的風(fēng)險增加3倍，而攜帶二條E4變異，得病風(fēng)險增加12倍。并且攜帶E4變異的患者癥狀出現(xiàn)得更年輕，病程發(fā)展更快，腦中的淀粉樣蛋白斑塊也更多更大更結(jié)實(shí)。（Nat Rev Neurol. 2013 Feb; 9(2): 106–118）

以下數(shù)據(jù)包括APOE2-HU, APOE3-HU, APOE4-HU三種小鼠的構(gòu)建策略和鑒定數(shù)據(jù)。

APOE2-HU人源化小鼠驗證數(shù)據(jù)

構(gòu)建策略

Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE2人源化小鼠構(gòu)建策略。

表達(dá)驗證

Fig2. RT-PCR驗證結(jié)果。引物對 P1/2 特異針對野生型及基因敲除小鼠，引物對 P3/4 特異針對APOE2人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物對可擴(kuò)增出 342 bp 產(chǎn)物; KO小鼠用 P1/2 引物對無條帶,人源化小鼠用 P3/4 引物對可擴(kuò)增出 332 bp 產(chǎn)物。

引物對 P1/2 Wild type = 342 bp

引物對 P3/4 mutant = 332 bp

M：100bp Plus DNA ladder.

Fig3. Western blot 檢測發(fā)現(xiàn) APOE2 蛋白在人源化小鼠中有高表達(dá)。

APOE抗體：Sc-13521(santa cruz)

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Apoe3-HU人源化小鼠驗證數(shù)據(jù)

構(gòu)建策略

Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE3人源化小鼠構(gòu)建策略。

表達(dá)驗證

Fig2. RT-PCR驗證結(jié)果。引物對 P1/2 特異針對野生型及基因敲除小鼠，引物對 P3/4 特異針對APOE3 人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物對可擴(kuò)增出 342bp? 產(chǎn)物;? KO 小鼠用 P1/2引物對無條帶,人源化小鼠用 P3/4 引物對可擴(kuò)增出332bp 產(chǎn)物。

引物對 P1/2 Wild type = 342 bp

引物對 P3/4 mutant = 332 bp

M：100bp Plus DNA ladder.

Fig3. Western blot 檢測發(fā)現(xiàn) APOE3 蛋白在人源化小鼠中高表達(dá)。

APOE抗體：Sc-13521 (santa cruz)

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Apoe4-HU人源化小鼠驗證數(shù)據(jù)

構(gòu)建策略

?Fig1. Apoe 敲除小鼠、APOE4人源化小鼠構(gòu)建策略。

表達(dá)驗證

Fig2. RT-PCR驗證結(jié)果。引物對 P1/2 特異針對野生型及基因敲除小鼠，引物對 P3/4 特異針對APOE4 人源化小鼠。WT小鼠用 P1/2 引物對可擴(kuò)增出 342bp? 產(chǎn)物;? KO 小鼠用 P1/2引物對無條帶,人源化小鼠用 P3/4 引物對可擴(kuò)增出332bp 產(chǎn)物。

引物對 P1/2 Wild type = 342 bp

引物對 P3/4 mutant = 332 bp

M：100bp Plus DNA ladder.

Fig3. Western blot檢測發(fā)現(xiàn) APOE4 蛋白在人源化小鼠中高表達(dá)。

APOE抗體：Sc-13521(santa cruz)

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