小師弟：師姐，求助！我之前已經(jīng)做了一批實(shí)驗(yàn)，結(jié)果挺好的，但是后面小鼠繁育比較慢，養(yǎng)了很久，終于得到幾只實(shí)驗(yàn)組，但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果和上一組居然不一致，怎么辦？

大師姐：不急不急。你可能要找一下源頭，小鼠繁育能力突然下降可能是發(fā)生感染，你有注意到小鼠有什么變化嗎？

小師弟：哦！好像除了生的少，精神狀態(tài)也不太好，毛發(fā)也沒有以前那么光亮，還死了2只。

大師姐：那應(yīng)該就是發(fā)生感染了，建議盡快做凈化，否則會(huì)影響整個(gè)品系，對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響也更大。

小師弟：懂了！謝謝師姐！

保持實(shí)驗(yàn)鼠的健康，對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性至關(guān)重要。但在實(shí)際操作中，實(shí)驗(yàn)鼠由于各種原因?qū)е赂腥镜那闆r屢見不鮮。被細(xì)菌，病毒和體內(nèi)外寄生蟲感染的小鼠，不僅自身健康受到威脅，混淆研究成果，甚至還有可能傳播給其他品系的小鼠，因此小鼠的凈化非常關(guān)鍵和必要。

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何時(shí)需要凈化？

在正常的飼養(yǎng)過程中，如果小鼠狀態(tài)正常，凈化是不必要的，但是遇到以下情況建議凈化：

• 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果不穩(wěn)定，重復(fù)性差，實(shí)驗(yàn)鼠已經(jīng)確認(rèn)受到病原體污染；

• 懷疑受到感染，但是已經(jīng)出現(xiàn)以下癥狀：繁殖能力降低，實(shí)驗(yàn)鼠健康狀態(tài)不好，已經(jīng)影響到實(shí)驗(yàn)鼠生命或者影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

• 進(jìn)口鼠漂洋過海來到國內(nèi)動(dòng)物房，需要隔離檢疫以及凈化；

• 實(shí)驗(yàn)鼠要“搬家”，“新家”的屏障系統(tǒng)更嚴(yán)格。

如何凈化？

凈化通俗點(diǎn)講，是將確認(rèn)病原體感染或者疑似感染的“臟臟鼠”傳代獲得不含特定病原體的子代鼠。從小的方面講，凈化是為了實(shí)驗(yàn)鼠品系的健康不受到威脅，保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)不受病原體感染影響，從大方面講，也是為動(dòng)物屏障內(nèi)其他品系的健康保駕護(hù)航。

那么凈化如何做？洗洗澡？噴點(diǎn)酒精？

NO，NO，NO！

要是那樣能做到凈化就真的太好了，因?yàn)檎嬲膬艋愃啤皻㈦u取卵”：實(shí)驗(yàn)鼠自身雖然被感染，但是精子或卵細(xì)胞在體內(nèi)是干凈無菌，很多情況下凈化是要從感染的親本中，獲得“干凈”的子代。因此小鼠凈化是“犧牲我一個(gè)，健康你我它”的壯舉，需要為之付出生命代價(jià)。

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凈化方式1---剖腹產(chǎn)

由于胎盤屏障會(huì)隔絕大部分病原微生物，因此可以通過剖腹產(chǎn)的方式，取出后代鼠，從而獲得沒有被感染的新一代實(shí)驗(yàn)鼠。剖腹產(chǎn)過程中，為了避免子代受到感染，母鼠處死后以及剖出的鼠仔都要消毒。此外還要提前準(zhǔn)備好代乳奶媽，提前做好食仔預(yù)防，剖出的鼠仔后續(xù)要由奶媽代養(yǎng)。

優(yōu)點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)鼠自然交配即可，凈化快

缺點(diǎn)：

• 獲得子代數(shù)量有限

• 需要精確掌握母鼠的生產(chǎn)時(shí)間，在母鼠生產(chǎn)前進(jìn)行剖腹產(chǎn)，否則剖出的鼠仔就屬于早產(chǎn)，后續(xù)飼養(yǎng)也有比較高的死亡風(fēng)險(xiǎn)。

• 垂直傳播的病原微生物感染是不能通過該種方式進(jìn)行。

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凈化方式2---體內(nèi)胚胎移植

將雄鼠和超排后的雌鼠交配，然后處死見栓的雌鼠，通過沖洗輸卵管的方式收集受精卵，胚胎移植到無感染的假孕母鼠輸卵管或者子宮中，從而獲得凈化后的實(shí)驗(yàn)鼠品系。

優(yōu)點(diǎn)：獲得的子代鼠仔是足月生產(chǎn)

缺點(diǎn)：

• 獲得子代數(shù)量有限

• 檢栓后，見栓的雌鼠都會(huì)被處死，但是處死后不一定都能取到受精卵，因此有可能出現(xiàn)斷種。

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凈化方式3：體外受精后胚胎移植（IVF凈化）：

雄鼠處死后取精子，然后將激活后的精子與超排的卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精(IVF, in vitro fertilization)得到受精卵，再移植到代孕小鼠的子宮中，生育出凈化的子代鼠仔。該方式是目前最popular的凈化方式。

優(yōu)點(diǎn)：

IVF技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)1只雄鼠對(duì)應(yīng)10-20只雌鼠同時(shí)受孕，因此IVF凈化，在凈化的同時(shí)，還能達(dá)到快速繁育的目的，同時(shí)獲得更多數(shù)目的子代鼠，效率高，縮短繁育周期，極大地加快科研進(jìn)度。

缺點(diǎn)：有一定技術(shù)門檻

3種凈化方式，如何選擇？

由于剖腹產(chǎn)存在“早產(chǎn)”和食仔的風(fēng)險(xiǎn)，為了減少對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的影響，現(xiàn)在很少采用這種方式。而體內(nèi)胚胎移植和IVF凈化這兩種凈化方式，可以根據(jù)現(xiàn)有小鼠情況以及后續(xù)實(shí)驗(yàn)需要而定：

凈化后的實(shí)驗(yàn)鼠通常是SPF級(jí)的，為了確保凈化效果，凈化完成后會(huì)將小鼠品系單獨(dú)送檢，檢測合格后，艱巨而偉大的凈化任務(wù)就完成了！在此致敬為凈化而做出犧牲的親代鼠！

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