在給小鼠采血、手術(shù)、檢測之前，常常需要先對小鼠進行麻醉。麻醉劑選擇不當或劑量使用不妥，可能直接影響到后續(xù)手術(shù)或?qū)嶒灥倪M行，甚至直接導(dǎo)致小鼠死亡呢！小鼠麻醉有哪些方法？麻醉過程中需要注意哪些細節(jié)？本周的“小鼠大學問”我們就來談?wù)勑∈蟮穆樽怼?/p>

麻醉：通過給予麻醉劑，抑制局部或中樞神經(jīng)系統(tǒng)的直覺與動作反射。一般分為兩種：吸入性麻醉和注射性麻醉。

吸入性麻醉

使用吸入性麻醉劑對小鼠進行誘導(dǎo)或者麻醉。一般需要通過氣體麻醉蒸發(fā)儀配合小鼠麻醉操作。

常用的吸入性麻醉劑有：

• Isoflurane

• Sevoflurane

• Halothane

注射性麻醉

可根據(jù)實驗或手術(shù)類型及需要麻醉時間選擇適當?shù)穆樽韯?/p>

氯胺酮+塞拉嗪（Ketamine+xylazine）混合麻醉劑

麻醉時間30min左右，安全范圍大，小鼠麻醉非常平穩(wěn)，而且有一定的鎮(zhèn)痛作用。

戊巴比妥鈉（Pentobarbital）

麻醉時間一般40-60min，但安全范圍窄，一旦過量動物容易發(fā)生死亡。并且戊巴比妥鈉沒有鎮(zhèn)痛作用只有鎮(zhèn)靜作用，因此手術(shù)前配合鎮(zhèn)痛劑一起使用效果會更好。

三溴乙醇（Tribromoethanol）

非藥物級別的腸麻藥，麻醉時間約30min，不同品系的小鼠耐受性不同，不能反復(fù)注射，否則容易引發(fā)動物的腸道炎癥。

丙泊酚（Propofol）

用于小鼠靜脈注射使用。麻醉時間較短，不常使用。

除全身麻醉以外，在手術(shù)的局部麻醉或者緩解局部疼痛和瘙癢時可以使用局部麻醉藥，如利多卡因。比如：小鼠發(fā)生皮膚異常瘙癢時，可以局部涂抹的凝膠緩解瘙癢的癥狀。

溫馨提示：

麻醉前，一定要給小鼠稱重，并按照參考劑量給予麻醉劑。

如果進行手術(shù)操作，那么建議在術(shù)前進行鎮(zhèn)痛，對小鼠術(shù)后的恢復(fù)以及減少疼痛感非常有益。

若術(shù)后部分小鼠有疼痛癥狀可以根據(jù)情況選擇合適的給藥途徑給予鎮(zhèn)痛藥。

小鼠的鎮(zhèn)痛劑主要有：布托啡諾，美洛昔康，卡洛芬，布洛芬，嗎啡，丁丙諾啡等。

當然，小鼠的麻醉和鎮(zhèn)痛都需要咨詢獸醫(yī)。根據(jù)手術(shù)的類型選擇合適的麻醉劑鎮(zhèn)痛劑。麻醉藥品及鎮(zhèn)痛藥品均必須合理使用，嚴格記錄，嚴格按照國家法律法規(guī)來進行申請、使用及管理。通常申請麻醉藥品的流程是這樣的，以上海南方模式生物為例：

麻醉藥品和鎮(zhèn)痛藥品存放要設(shè)立專庫或?qū)９?，專庫和專柜要設(shè)有防盜設(shè)施，實行專人負責、專庫（柜）加鎖。對進出專庫（柜）的麻醉藥品、鎮(zhèn)痛藥品建立專用帳冊，進出逐筆記錄，詳細填寫《麻醉及鎮(zhèn)痛藥品收支記錄表》。剩余麻醉品須歸還麻醉藥品管理負責人員。對回收的空安瓿、廢貼和過期、失效、破損、退回的藥品須妥善保管，集中銷毀，同時需要登記《管制麻醉藥品銷毀記錄》。

麻醉后的注意事項

1.小鼠麻醉后一定要進行麻醉深度的確認。若麻醉深度不夠則必須延后實驗，應(yīng)當待達到麻醉深度后再進行實驗或手術(shù)；或者咨詢獸醫(yī)是否可以增加劑量使其達到麻醉深度。

麻醉由淺入深一般可以分為4個階段：

• 誘導(dǎo)期：仍有主動動作，呼吸與心率增加，運動時步態(tài)不穩(wěn)、后半身搖晃，后肢無力。

• 淺外科期：停止運動后呈側(cè)臥狀，置于仰臥后不能翻正。對非疼痛刺激物肢體動作反應(yīng)，捏夾皮膚或刺激腳趾仍有收縮反射，呼吸規(guī)則以胸式呼吸為主，出現(xiàn)中等程度的肌肉松弛，眼瞼和角膜反射存在。

• 深外科期：呼吸頻率下降，呼吸規(guī)則以腹式呼吸為主，肌肉完全松弛，眼瞼反射消失、角膜反射微弱，對嚴重刺激都不引起有害反射。

• 脫離深外科期：四肢持續(xù)震顫、抽搐，全身肌肉開始收縮，由平坦仰臥狀轉(zhuǎn)為側(cè)臥蜷縮狀。

簡單的確認麻醉深度的方式是：

• 皮膚捏夾反應(yīng)：用有齒鑷捏夾小鼠皮膚。

• 刺激腳趾反應(yīng)：刺激小鼠腳趾或腳掌部位。

觀察小鼠是否有反應(yīng)，若反應(yīng)靈敏則說明麻醉過淺。有手術(shù)條件的可以增加手術(shù)監(jiān)測儀器用于監(jiān)測血流、心率、血壓、體溫、呼吸頻率、血氧飽和度、微血管充盈時間等指標。

2.在動物手術(shù)過程中，如果臟器長時間暴露，應(yīng)適當?shù)渭訙匦缘纳睇}水，防止粘膜發(fā)干；眼部周圍可以涂抹潤滑的眼膏，減少由于眼部干燥引發(fā)的術(shù)后不適。

3.麻醉后小鼠體溫調(diào)節(jié)機能被抑制，出現(xiàn)體溫下降。此時，常需要采取保溫措施，比如：恒溫加熱毯、暖照燈等。

如果進行過手術(shù)，那么術(shù)后除了需要保溫，還要注意每過10-15min建議給小鼠翻身，防止血液沉積或肺葉的塌陷。另外應(yīng)注意觀察小鼠的重要的指標如心率、毛細管充盈程度及呼吸頻率等。

術(shù)后應(yīng)提供無菌的籠具和舒適，安靜的飼養(yǎng)環(huán)境，若術(shù)部的牽拉會阻礙小鼠術(shù)后初期的飲水，應(yīng)當在小鼠的籠內(nèi)底部放置無菌的果凍及輻照后的飼料供其采食。術(shù)后必須有觀察人員對術(shù)后的小鼠進行觀察，如術(shù)部開線，感染及發(fā)生疼痛異常等癥狀應(yīng)按照獸醫(yī)的指導(dǎo)進行操作。