【小鼠大學(xué)問(wèn)】5種重要的采血姿勢(shì)你get了嗎?
尾尖采血
- 麻醉小鼠后,用溫水擦拭尾巴,引起輕微的血管擴(kuò)張。但水溫不要過(guò)高。
- 用無(wú)菌手術(shù)刀、刀片或鋒利的剪刀,快速截?cái)嘈∈笪布?.5-1cm。如果需要多次采血,之后每次僅需截除2-3mm。
- 可以從尾部向尾尖方向按摩,以增加血流。但是,這會(huì)降低血樣的質(zhì)量,增加溶血的風(fēng)險(xiǎn)。
- 可以用毛細(xì)采血管收集血液,或直接滴入收集管中。
- 采血結(jié)束后,按壓傷口或使用止血?jiǎng)ㄈ缦跛徙y)來(lái)止血。
- 每次采血量大約可達(dá)0.1ml。
眼眶靜脈叢采血
- 小鼠經(jīng)氣體麻醉后,左手拇指及食指壓迫小鼠的頸部?jī)蓚?cè),使眼球突出,眼眶后靜脈叢充血。也可以將小鼠放置在側(cè)臥位,拇指與食指分別置于小鼠頭頂和下頜,將皮膚向后及向下拉。
- 抓握時(shí)要避免對(duì)氣管施壓,否則可能會(huì)影響小鼠呼吸。
- 將毛細(xì)采血管置于內(nèi)側(cè)眼角處,并且以與鼻翼平面成30-45度刺入。
- 在輕輕旋轉(zhuǎn)采血管的同時(shí)施加壓力。血液將通過(guò)毛細(xì)作用流入采血管。
- 不能刺地過(guò)深,一般2-3mm即可。
- 采血結(jié)束后,立即松開(kāi)手指對(duì)小鼠的壓迫,使眼球復(fù)位,同時(shí)將采血器拔出。
- 可用干棉球壓住眼眶,確保止血。
一般眼眶靜脈叢采血量可以達(dá)到0.2-0.3ml。
- 保定小鼠,可將小鼠側(cè)臥,使小鼠頭部盡量固定。
- 在小鼠嘴角沿線與外眼角線橡膠處找到頜下靜脈的大致位置,會(huì)發(fā)現(xiàn)一個(gè)無(wú)毛的小點(diǎn),有點(diǎn)像酒窩?;疚挥谧旖沁h(yuǎn)端稍低于下巴線。
- 針保持垂直于皮膚表面,刺入皮膚。深度不超過(guò)針頭的斜面。
- 拔出針頭后,血液就會(huì)流出。為方便采血,可使小鼠頭部低于心臟高度。
- 可以直接使血液滴入采集管,也可以使用毛細(xì)采血管。
- 采血結(jié)束后,按壓以止血。
一般采血量為0.2-0.5ml。
- 將小鼠置于固定管或架中,但保持后腿可自由活動(dòng),剃除跗部的毛。
- 為使膝蓋與踝關(guān)節(jié)之間的隱靜脈更加明顯,可以在后腿膝蓋以上使用止血帶。在近尾側(cè)的皮膚表面可以找到隱靜脈。
- 針垂直于皮膚表面扎破血管。不要進(jìn)針過(guò)深,以免刺穿肌肉或碰到骨頭。
- 血液會(huì)從入針處慢慢流出,用毛細(xì)采血管收集,并松開(kāi)止血帶。
采血結(jié)束后,按壓傷口或使用止血?jiǎng)ㄈ缦跛徙y)以止血,并將小鼠放回籠內(nèi)。
心臟采血
- 一般有3種心臟采血的姿勢(shì):
1、托起小鼠軀干使身體垂直與地面。身體直立以防止心臟的偏轉(zhuǎn)或胸部的扭曲。使用1毫升注射器和22g針頭。將針頭從胸部中央向下5mm處插入,深度5-10mm,將注射器與胸部保持25-30度。
2、使小鼠仰臥,通過(guò)胸骨垂直插入針頭。
3、使小鼠側(cè)臥,垂直于胸壁插入針頭。 - 如果血液沒(méi)有立刻進(jìn)入注射器,可以輕輕抽空針管,產(chǎn)生一個(gè)真空區(qū)。
- 當(dāng)注射器中出現(xiàn)血液時(shí),將針管保持靜止并輕輕地抽拉活塞芯桿,以獲得更多地血液。
一般可以采到0.8-1.0ml血液。
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