【小鼠大學問】采血,這些知識也許你還不知道
小鼠的循環(huán)血量大約是72ml/kg
小鼠的循環(huán)血量大約是72ml/kg。以25g的成年小鼠為例,它的循環(huán)血量大約為1.8ml。
大鼠的循環(huán)血量大約是64ml/kg。以250g的成年大鼠為例,它的循環(huán)血量大約為16ml。
采集10%的循環(huán)血量之后,大約需要2周時間恢復(fù)
狀況良好的小鼠一般采血量建議不超過循環(huán)血量的10%。有研究表明失血超過15%以上實驗動物會發(fā)生血量減少性休克。以25g的成年小鼠為例,10%的循環(huán)血量大約是0.2ml。
采血之后,小鼠需要一段時間的恢復(fù),其血液指標才會恢復(fù)到正常水平。下面的表格列出了不同采血量對應(yīng)的恢復(fù)期:
如果需要多點采血,每周最大采血量最好不超過循環(huán)血量的7.5%;每兩周最大采血量不超過循環(huán)血量的10%。
全血、血漿、血清的區(qū)別
全血
包括血細胞和血漿的所有成分。采集全血時,收集管中必須含有抗凝劑。常用的抗凝劑有:肝素、檸檬酸鈉和乙二胺乙酸酸 (EDTA)。根據(jù)不同研究需要進行選擇。
血漿
是全血經(jīng)抗凝處理后,通過離心沉淀,獲得的不含細胞成分的液體。含有纖維蛋白原、凝血因子等。
血清
是全血未經(jīng)過抗凝處理,血凝塊聚縮釋出的液體。其中沒有纖維蛋白原和凝血因子。
分離血漿和血清的一般方法是:2200-2500rpm 離心至少15分鐘。
眼眶靜脈叢采血之前,需要麻醉小鼠
眼眶靜脈叢采血之前,必須麻醉小鼠。通常需要全身麻醉。
如果不能全身麻醉,那在操作之前,可以用丙美卡因或丁卡因?qū)ρ鄄窟M行局部麻醉。
眼眶靜脈叢采血法具有采血成功率高,小鼠死亡率低,血流較快,采血量多,傷口較小的優(yōu)點。但用這種方法不能采集到無菌的血樣,血液中可能混有眼窩內(nèi)的組織液和腺體分泌物。
如果需要多次采血,為保證小鼠的傷口愈合,兩次采血之間應(yīng)有10-14天的間隔。如果操作不當或?qū)ν恢谎鄱啻尾裳赡芤鹨恍┎l(fā)癥,如眼出血、炎癥和失明等。
比眼眶靜脈叢采血更適合多次采血的方法是?
頜下靜脈采血或隱靜脈采血,這兩種采血方法在操作前都不需要麻醉。而且對小鼠的傷害小,采血量與眼眶靜脈叢采血法相當,采血后恢復(fù)快。所以比眼眶靜脈叢采血更適合多次采血。
給小鼠采血還有哪些方法呢?應(yīng)該如何選擇?
從小鼠不同的部位采血,大致有以下幾種常用的采血方式:
尾尖采血、眼眶靜脈叢采血、頜下靜脈采血、隱靜脈采血、心臟采血。
這些采血方式應(yīng)該怎么選擇呢?看了它們各自有什么特點,你大致就有概念了。
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2、Diehl K. H. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J.Appl.Toxicol.21,15-23(2001).
3、Janet H, et al. Methods of Blood Collection in the Mouse.Lab Animal.29 (10):47-53.(2010).
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