【小鼠大學(xué)問】讓繁育快快快的秘方!
什么是快速繁育?
我們說的快速繁育就是指使用極少數(shù)的雄鼠來獲得大量同一周齡子代小鼠。
快速繁育的原理是什么?
其實快速繁育的核心就是體外受精(IVF, in vitro fertilization)—— 采用體外培養(yǎng)的方式,將激活后的精子與卵母細(xì)胞進行體外受精并移植入假孕母鼠體內(nèi),獲得子代小鼠。
IVF 的優(yōu)勢:用四個字來形容,那就是:多快好省
多:在相同的時間里,利用相同數(shù)量的父代小鼠,通過 IVF 方法可以獲得更多的子代小鼠。
快:大大節(jié)約繁育周期,一般自然繁育一代的周期為3個月,而 IVF 僅需1.5個月!
好:同批獲得的子代小鼠周齡差異不會超過7天,降低了由于小鼠周齡差異導(dǎo)致的實驗誤差,實驗數(shù)據(jù)更可靠。
省:只需要2只雄鼠,就可以獲得足夠數(shù)量的子代。省時省力,解放人力,節(jié)約了大量的繁育時間同時也優(yōu)化了繁育方式。
IVF Protocol
1.培養(yǎng)皿準(zhǔn)備
HTF:在35mm皿中做200ul的HTF微滴2個,上覆礦物油。
2.精子的采集
(1) 將符合要求的性成熟(8周以上)的雄鼠頸椎脫臼處死,取出附睪上體尾部,去除脂肪與血跡后,置于HTF液內(nèi)。
(2) 利用眼科剪在液滴內(nèi)橫斷附睪尾,當(dāng)精子充分游離出附睪尾后,將組織從液滴內(nèi)取出,將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱。
3.卵母細(xì)胞的收集
處死超排后的雌鼠,取出兩側(cè)的輸卵管,用顯微鑷將卵母細(xì)胞團撥到受精滴中。
4.精卵混合
用10ul移液器從精子滴吸取精子,加到卵子滴中,根據(jù)卵團大小情況以及精子的活力每滴加8ul左右的精子。將精卵混合后,把培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
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