【小鼠大學(xué)問】讓繁育快快快的秘方!


什么是快速繁育?

我們說的快速繁育就是指使用極少數(shù)的雄鼠來獲得大量同一周齡子代小鼠。

快速繁育的原理是什么?

其實快速繁育的核心就是體外受精IVF, in vitro fertilization)—— 采用體外培養(yǎng)的方式,將激活后的精子與卵母細(xì)胞進行體外受精并移植入假孕母鼠體內(nèi),獲得子代小鼠。


IVF 的優(yōu)勢:用四個字來形容,那就是:多快好省

  • 多:在相同的時間里,利用相同數(shù)量的父代小鼠,通過 IVF 方法可以獲得更多的子代小鼠。

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  • 快:大大節(jié)約繁育周期,一般自然繁育一代的周期為3個月,而 IVF 僅需1.5個月!

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  • 好:同批獲得的子代小鼠周齡差異不會超過7天,降低了由于小鼠周齡差異導(dǎo)致的實驗誤差,實驗數(shù)據(jù)更可靠。

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  • 省:只需要2只雄鼠,就可以獲得足夠數(shù)量的子代。省時省力,解放人力,節(jié)約了大量的繁育時間同時也優(yōu)化了繁育方式。

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哎唷,看上去很厲害的樣子!快速繁育到底有多快,讓數(shù)字說話~

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圖表1. 快速繁育 vs 常規(guī)繁育 周期對比,注:同時獲得的小鼠周齡差距在一周之內(nèi)


IVF Protocol

1.培養(yǎng)皿準(zhǔn)備

HTF:在35mm皿中做200ul的HTF微滴2個,上覆礦物油。

2.精子的采集
(1) 將符合要求的性成熟(8周以上)的雄鼠頸椎脫臼處死,取出附睪上體尾部,去除脂肪與血跡后,置于HTF液內(nèi)。

(2) 利用眼科剪在液滴內(nèi)橫斷附睪尾,當(dāng)精子充分游離出附睪尾后,將組織從液滴內(nèi)取出,將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱。

3.卵母細(xì)胞的收集

處死超排后的雌鼠,取出兩側(cè)的輸卵管,用顯微鑷將卵母細(xì)胞團撥到受精滴中。

4.精卵混合

用10ul移液器從精子滴吸取精子,加到卵子滴中,根據(jù)卵團大小情況以及精子的活力每滴加8ul左右的精子。將精卵混合后,把培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

除了快速繁育,下方的小鼠凈化及保種技術(shù)服務(wù)也會經(jīng)常用到哦~

凈化服務(wù)

由于各種原因,小鼠可能被病原感染,并傳播感染其他品系的小鼠,從而危及感染小鼠的健康,混淆研究成果。我們的凈化服務(wù)將為您解除這種煩惱,提供符合SPF級要求的小鼠。您只需提供雄鼠,與超排后的雌鼠進行交配,48小時左右取出2-cell的受精卵移植入SPF級受體體內(nèi),出生小鼠進行基因型鑒定。

胚胎保種服務(wù)

將指定品系的基因工程小鼠與超排的雌鼠交配,取2-cell期胚胎,并采用程序降溫的方法進行胚胎凍存,保存在液氮中。

胚胎復(fù)蘇服務(wù)

冷凍保存的胚胎經(jīng)復(fù)蘇后移植到假孕母鼠體內(nèi)(輸卵管移植或子宮移植),受體鼠及新生鼠均維持在SPF級小鼠飼養(yǎng)環(huán)境中,進行仔鼠出生記錄及基因型鑒定等。



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