【小鼠大學(xué)問】達人干貨分享
基礎(chǔ)知識
模式生物
近交系和遠交系
雜交和回交
繁育代數(shù)
SPF
-
哨兵鼠
提到模式生物,你想到的第一個是什么?是小鼠、斑馬魚、線蟲還是擬南芥?
恭喜你,答對了!以上都是常見的模式生物。所謂的模式生物是可用于研究與揭示生命體某種具有普遍規(guī)律的生物現(xiàn)象的一類生物。當然,并不是所有的生物都適合作為模式生物,看了模式生物所具備的特點后你就能理解啦。
模式生物主要有 3 大特點:
有利于回答研究者關(guān)注的問題,生理特征能夠代表生物界的某一大類群
世代短、子代多、易于在實驗室內(nèi)飼養(yǎng)繁殖、遺傳背景清楚
容易進行實驗操作,特別是遺傳操作以及表型分析
關(guān)于常用模式生物的詳細介紹請參見今天推的另一篇文章哦,不是小編偷懶,內(nèi)容實在太豐富,分開介紹更容易閱讀。
近交系
經(jīng)連續(xù) 20 代(或以上)的全同胞兄妹交配(或者親代與子代交配)培育而成,近交系數(shù)應(yīng)大于 99%,品系內(nèi)所有個體都可追溯到一對共同祖先。
特點:遺傳背景均一,實驗結(jié)果一致性好;近交系由于近交衰退,生活力弱,對飼養(yǎng)環(huán)境要求高,產(chǎn)仔少,營養(yǎng)要求高。
由于近交系小鼠具有遺傳背景均一、實驗結(jié)果一致性好的優(yōu)點,在使用小鼠作為我們研究基因功能或疾病機制的實驗動物時,近交系小鼠往往是我們的首選。需要注意的一點是:某些基因突變導(dǎo)致的表型在不同的近交系中可能有所不同。
常用的近交系小鼠有:
C57BL/6J
C57BL/6J 也叫 B6、B6J、Black 6 或 C57 Black,是使用最為廣泛的近交系小鼠,也是第一個完成基因組測序的品系。
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??
?來源:jax.org
C57BL/6J 近交系小鼠由 Clarence Cook Little 博士通過將 57 號雌鼠與 52 號雄鼠交配獲得,毛色為黑色。自發(fā)腫瘤較少,乳腺腫瘤自發(fā)率很低;對放射物耐受力中等;補體活性高;抗聽源性驚厥;骨密度較低;隨年齡增長會發(fā)生聽力障礙;高脂飲食誘導(dǎo)后易有肥胖表型、易發(fā)生 2 型糖尿病以及動脈粥樣硬化;小眼瞼炎及其他相關(guān)眼睛異常發(fā)生率高;有過度理毛行為,導(dǎo)致脫毛;偏好酒精和嗎啡;咬合錯位和腦積水發(fā)生率較高。
C57BL/6J 是目前最常用的基因工程小鼠模型、人類疾病小鼠模型、自發(fā)或誘導(dǎo)突變品系的遺傳背景,用于心血管生物學(xué),發(fā)育生物學(xué),糖尿病和肥胖,遺傳學(xué),免疫學(xué),神經(jīng)生物學(xué)和感覺神經(jīng)研究。
BALB/c
BALB/c 小鼠毛色為白色,被大家熟知主要是由于其在單克隆抗體與免疫學(xué)研究中的貢獻。BALB/c 小鼠對實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)和實驗性過敏性睪丸炎(EAO)具有抗性。對放射線極為敏感。乳腺癌發(fā)病率低,但隨著年齡增長,患其他癌癥(如肺癌和腎癌)的幾率大為增加。有一定數(shù)量的卵巢、腎上腺和肺部腫瘤、白血病的發(fā)生。
? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 來源:jax.org
FVB
FVB 小鼠,毛色白色,起源于 Swiss 小鼠,1966 年起開始選育,在接種白日咳疫苗后,其中一系 HSFS/N 對組胺敏感。到 70 年代初 HSFS/N 系第 8 代中,發(fā)現(xiàn)攜帶Fv1b等位基因的小鼠對 B 型 Friend 白血病毒敏感,后將這些小鼠育成 Fv1b 同型合子近交系,故稱 FVB。由于 FVB 小鼠受精卵中的原核突出顯著且生產(chǎn)性能好、產(chǎn)仔數(shù)大,常用于轉(zhuǎn)基因顯微注射。FVB 小鼠自發(fā)腫瘤率低,但化學(xué)誘導(dǎo)易發(fā)鱗狀細胞癌。
遠交系
在一定群體內(nèi),以非近親交配方式育成的動物品系,且連續(xù) 15 代不從外部引入新的動物種群。
特點:遺傳背景具有群體均一性,但個體各異,實驗?zāi)軌蚍从程囟ㄈ后w遺傳背景下的情況;繁殖能力強,環(huán)境適應(yīng)能力高。
ICR 鼠和昆明鼠都是常見的遠交系品系。
雜交一代
兩個不同近交系雜交所生的第一代動物稱為雜交一代動物或 F1 代。
特點:個體間遺傳均一,其基因位點均為雜合型,實驗結(jié)果比較一致;具有雜種優(yōu)勢,如體質(zhì)健壯、生長快、易于飼養(yǎng)管理、發(fā)育均勻等優(yōu)點。
回交
用于遺傳背景的純化:在基因工程小鼠模型(例如基因敲除、基因敲入等)的應(yīng)用中,由于小鼠胚胎干細胞品系的局限性,通過胚胎干細胞打靶技術(shù)獲得的特定基因修飾小鼠遺傳背景與研究者希望的實驗小鼠遺傳背景可能是不一致的。這時就需要通過與特定近交系小鼠回交的方式,將實驗小鼠從一種遺傳背景(A)轉(zhuǎn)換到另一種研究人員想要的遺傳背景(B)上去。
隨著回交代數(shù)的增加,后代小鼠中 A 遺傳背景的比例逐漸減低,而 B 遺傳背景的比例不斷提高,最終獲得接近于帶有 100% B 遺傳背景的基因修飾實驗小鼠,通常需要回交 10 代以上。需要指出的一點是:在這種回交過程中,修飾位點附近區(qū)域,很難被回交品系DNA重組。
用于不同基因型小鼠的交配,與相同基因型自交相對應(yīng):以 C 基因敲除小鼠為例,通常將 ?C 基因野生型小鼠用 +/+ 表示,將 C 基因敲除純合子小鼠用 -/- 表示,將 C 基因敲除雜合子小鼠用 +/- 表示。C 基因敲除雜合小鼠之間相互交配,稱為自交,即 +/- × +/-;而 C 基因敲除雜合子或純合子與野生型小鼠交配,也可叫回交,即 +/- × +/+ ?或 -/- × +/+。
繁育代數(shù)
小鼠交配后獲得子代即為繁育一代。我們在查閱小鼠品系背景時,經(jīng)常會看到類似?N3F2 的字段,這其實表示了該品系小鼠回交和雜交的情況。
字母 N 加上具體數(shù)字表示回交代數(shù),如回交了 3 代可表示為 N3;
字母 F 加上具體數(shù)字則表示自交或雜交代數(shù),如雜合子自交了 2 代可表示為 F2。
因此,N3F2 表示該小鼠是先回交 3 代后再自交 2 代獲得的。
SPF
SPF是?Specific-pathogen-free?無特定病原體的縮寫,指不攜帶可能干擾實驗的特定病原體和寄生蟲的動物,需飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)中,實施嚴格的微生物和寄生蟲控制。SPF 級動物作為國際公認的標準實驗動物,可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)與醫(yī)學(xué)科研實驗。目前各個國家對于 SPF 的標準不同,需要檢測的微生物名錄也存在差異。
哨兵鼠
哨兵鼠主要是指將背景健康的外源小鼠引入重要的繁殖飼養(yǎng)群體,通過直接接觸目的鼠或間接接觸臟墊料的方式對飼養(yǎng)區(qū)域進行病原微生物的檢測,并替代重要飼養(yǎng)群體進行健康體檢的一類小鼠。通常未受特定病原污染的大于 4w 以上健康小鼠(免疫缺陷鼠除外)可選作哨兵鼠。
哨兵鼠的品系可根據(jù)需要選擇,如:ICR(CD1)、BALB/c、FVB、C57BL/6等等。哨兵鼠一般 2-3 只一籠,放置于所在籠架的最后一個回風(fēng)位。一般一籠哨兵動物監(jiān)控 60-100 籠的飼養(yǎng)架。哨兵鼠所用的墊料為這些飼養(yǎng)籠中其它小鼠生活過的臟墊料大約每籠 30-50g,且必須在臟墊料內(nèi)至少持續(xù)生活 4 周以上。
一般國標規(guī)定三個月為一個檢測周期,通過對哨兵鼠的檢測,可以在不影響實驗動物的情況下,實監(jiān)控環(huán)境中病原體的狀況,保證實驗動物健康和質(zhì)量標準化,保障實驗研究獲得可重復(fù)的結(jié)果。哨兵動物檢測也有局限性對于通過空氣傳播的,非接觸性傳播的病原微生物會漏檢。如仙臺病毒,嗜肺巴斯德桿菌等。因此建議對于隨機動物也要進行檢測。
你也可能感興趣
Cre-ERT2在無Tamoxifen誘導(dǎo)的情況下,在細胞質(zhì)內(nèi)處于無活性狀態(tài);當Tamoxifen誘導(dǎo)后,Tamoxifen的代謝產(chǎn)物4-OHT(雌激素類似物)與ERT結(jié)合,可使Cre-ERT2進核發(fā)揮Cre重組酶活性。
查看常見的基因工程小鼠可以分為兩種命名方式,包括基因定點修飾的小鼠命名,比如:敲除、敲入、點突變等等,和隨機轉(zhuǎn)基因的小鼠命名。
查看