腫瘤學(xué)研究中，還原腫瘤的發(fā)展進(jìn)程是科學(xué)家們研究的一大重點(diǎn)。在豐富的腫瘤小鼠模型中，有一類模型擁有腫瘤早期進(jìn)展特征和自發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于腫瘤的發(fā)生機(jī)制研究、腫瘤藥物篩選和評(píng)估以及免疫治療研究。這個(gè)模型就是基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型，也在某些情況被稱為自發(fā)性腫瘤小鼠模型。

原發(fā)肺癌小鼠模型

品系簡(jiǎn)稱：Stk11-Flox/R26-CAG-LSL-Luc-2A-EGFP/Kras-LSL-G12D

品系目錄號(hào)：NM-CKO-234719

相關(guān)基因：Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D

小鼠背景：C57BL/6

Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D小鼠是一種原發(fā)肺癌小鼠模型，包含了KRAS基因突變與STK11蛋白缺失。STK11突變經(jīng)常發(fā)生在非小細(xì)胞肺癌中（發(fā)生率超過(guò)10%），Kras 突變?cè)诜伟∟SCLC）占34%。KRAS突變基因的表達(dá)和Stk11的敲除需要Cre的存在才能發(fā)生，通過(guò)使用AAV-CRE對(duì)小鼠進(jìn)行誘導(dǎo)，可使小鼠產(chǎn)生腫瘤。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

圖1 Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D原發(fā)肺癌小鼠模型可通過(guò)AAV-CRE誘導(dǎo)引發(fā)肺癌。

圖2. Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D瘤塊來(lái)源細(xì)胞系的抗腫瘤藥效評(píng)價(jià)

品系簡(jiǎn)稱：Trp53-Flox/Kras-LSL-G12D

品系目錄號(hào)：NM-CKO-233079

相關(guān)基因：Trp53/Kras-LSL-G12D

小鼠背景：C57BL/6

Trp53-Flox/Kras-LSL-G12D小鼠是一種原發(fā)肺癌小鼠模型，包含了KRAS基因突變與Trp53蛋白缺失。腫瘤抑制因子Trp53在絕大多數(shù)小細(xì)胞肺癌 (SCLC) 腫瘤中失活；突變型Kras蛋白功能異常，持續(xù)處于激活狀態(tài)，會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的持續(xù)增殖。KRAS突變基因的表達(dá)和Trp53的敲除需要Cre的存在才能發(fā)生，通過(guò)使用AAV-CRE對(duì)小鼠進(jìn)行誘導(dǎo)，可使小鼠產(chǎn)生腫瘤。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

圖3 Trp53-Flox/Kras-LSL-G12D原發(fā)肺癌小鼠模型可通過(guò)AAV-CRE誘導(dǎo)引發(fā)肺癌。

品系簡(jiǎn)稱：Mki67-tdTomato-2A-Luc

品系目錄號(hào)：NM-KI-200223

相關(guān)基因：Ki67

小鼠背景：C57BL/6

Ki67蛋白被廣泛用作腫瘤標(biāo)志物，并且 Ki67指數(shù)與腫瘤疾病的病程相關(guān)，可用于評(píng)估患者生存和癌癥進(jìn)展。南模生物將Mki67-tdTomato-2A-Luc小鼠與Kras-LSL-G12D小鼠進(jìn)行交配，并通過(guò)AAV注射誘導(dǎo)KrasG12D/Mki67-Akaluc基因型小鼠形成腫瘤。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

圖4. Mki67-tdTomato-2A-Luc原發(fā)肺癌小鼠模型可通過(guò)AAV-CRE誘導(dǎo)引發(fā)肺癌。

原發(fā)胰腺癌小鼠模型

品系簡(jiǎn)稱：KPC

品系目錄號(hào)：NM-KI-210096

相關(guān)基因：TP53(R172H)/Pdx1/Kras(G12D)

小鼠背景：C57BL/6

KPC小鼠是目前成功建立的一種胰腺導(dǎo)管腺癌模型小鼠，具有很多與人胰腺癌相似的特點(diǎn)，如胰腺內(nèi)皮細(xì)胞瘤形成，強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)等。80%的KPC小鼠出現(xiàn)了肝轉(zhuǎn)移和肺轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。KPC小鼠包含了KRAS和TP53基因突變，而在人胰腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，分別有80%和70%的患者表達(dá)這兩種突變蛋白。 KPC小鼠的P53基因含有一個(gè)顯性抑制性點(diǎn)突變（ TP53R172H ），KRAS基因含有一個(gè)條件性活化點(diǎn)突變（KRASG12D）。KRAS突變基因的上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，其在沒(méi)有cre重組酶的條件下是不表達(dá)的。將Cre重組酶連接到PDX1的啟動(dòng)子后，其將在胰腺的腺泡、胰島和導(dǎo)管中表達(dá)。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

小鼠組織病理學(xué)檢測(cè)：

圖1 KPC小鼠模型的自發(fā)式性胰腺癌體和HE染色結(jié)果。胰腺表面不平整，多個(gè)結(jié)節(jié)狀突起；細(xì)胞排列無(wú)序，組織結(jié)構(gòu)呈不規(guī)則細(xì)胞團(tuán)，可見(jiàn)胰腺導(dǎo)管增生，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)纖維形成，符合腫瘤組織結(jié)構(gòu)特征。

KPC-luc原位移植小鼠模型：

圖2 KPC小鼠腫瘤細(xì)胞接種至野生C57BL/6小鼠的肝臟、肺、胰腺中的生長(zhǎng)情況。

KPC-luc皮下移植小鼠模型與藥效檢測(cè)

圖3. KPC小鼠瘤塊來(lái)源的細(xì)胞系的抗腫瘤藥效評(píng)價(jià)（宿主小鼠對(duì)為C57BL/6小鼠）。a. 藥效成瘤曲線, b. 藥效體重曲線, c. 腫瘤照片

品系簡(jiǎn)稱：Cdkn2a-Flox/Kras-LSL-G12D/Pdx1-Cre-Tg

品系目錄號(hào)：NM-XA-234942

相關(guān)基因：Cdkn2a/Pdx1/Kras(G12D)

小鼠背景：C57BL/6

Cdkn2a/Kras-G12D/Pdx1小鼠是一種胰腺導(dǎo)管腺癌模型小鼠，可以很好地反饋侵襲性 PDAC 之前的胰腺癌前病變等。Cdkn2a/Kras-G12D/Pdx1小鼠包含了KRAS基因突變與CDKN2A缺失。人類92% 的 PDAC檢測(cè)到Kras 突變，并且CDKN2A 的缺失是散發(fā)性 PDAC 中的關(guān)鍵致癌事件之一。KRAS突變基因的上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，其在沒(méi)有cre重組酶的條件下是不表達(dá)的；Cdkn2a也需要Cre的存在才能發(fā)生敲除。將Cre重組酶連接到PDX1的啟動(dòng)子后，其將在胰腺的腺泡、胰島和導(dǎo)管中表達(dá)。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

圖4 Cdkn2a/Kras-G12D/Pdx1原發(fā)胰腺癌小鼠模型的胰腺癌成瘤率、生存率、體重變化率。

原發(fā)肝癌小鼠模型

品系簡(jiǎn)稱：Alb-Cre-Tg/H11-CAG-LSL-Myc

品系目錄號(hào)：NM-KI-220458

相關(guān)基因：Alb/Myc

小鼠背景：C57BL/6

MYC是一種主要的致癌轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)參與細(xì)胞增殖、代謝和免疫逃避等多種途徑的靶基因，在多種癌癥的腫瘤發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在肝癌中，MYC及其信號(hào)通路發(fā)生顯著變化，對(duì)肝癌進(jìn)展產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響，包括腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移、去分化、代謝、免疫微環(huán)境和綜合治療耐藥等。這使得 MYC 成為一個(gè)有吸引力的靶點(diǎn)。MYC基因的上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，其在沒(méi)有cre重組酶的條件下是不表達(dá)的，將Cre重組酶連接到Alb的啟動(dòng)子后，其將在肝臟中表達(dá)。

驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

圖. H11-LSL-Myc/Rosa26-LSL-LuC-EGFP/Ab-Cre三陽(yáng)性小鼠自發(fā)肝癌瘤塊的同種移植實(shí)驗(yàn)。

基于基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型原代腫瘤細(xì)胞系

基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與人類相似，但腫瘤的發(fā)生參差不齊，周期長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)耗費(fèi)大。因而，南模生物從小鼠原發(fā)腫瘤建立起多種可在體外培養(yǎng)傳代的腫瘤細(xì)胞系，這些腫瘤細(xì)胞系不僅為癌細(xì)胞的體外生物學(xué)研究提供了工具，而且可以移植到遺傳背景相同、不會(huì)發(fā)生免疫排斥的其他小鼠體內(nèi)，建立移植瘤小鼠模型。

綜上，基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型在腫瘤學(xué)研究中扮演著重要角色，尤其是在探索腫瘤的發(fā)病機(jī)制、藥物篩選和個(gè)性化治療方面具有廣泛的應(yīng)用前景。如您有相關(guān)小鼠模型或定制化服務(wù)需求，歡迎隨時(shí)聯(lián)系我們！