腫瘤學(xué)研究中，還原腫瘤的發(fā)展進程是科學(xué)家們研究的一大重點。在豐富的腫瘤小鼠模型中，有一類模型擁有腫瘤早期進展特征和自發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于腫瘤的發(fā)生機制研究、腫瘤藥物篩選和評估以及免疫治療研究。這個模型就是基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型，也在某些情況被稱為自發(fā)性腫瘤小鼠模型。

原發(fā)肺癌小鼠模型

品系簡稱：Stk11-Flox/R26-CAG-LSL-Luc-2A-EGFP/Kras-LSL-G12D

品系目錄號：NM-CKO-234719

相關(guān)基因：Stk11/Kras-LSL-G12D

小鼠背景：C57BL/6

Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D小鼠是一種原發(fā)肺癌小鼠模型，包含Kras基因突變與STK11蛋白缺失。STK11突變在非小細胞肺癌（NSCLC）中發(fā)生率超過10%；Kras 突變在肺癌占34%，以NSCLC占比較多，肺鱗癌中占比較少。該模型Kras突變上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，在沒有Cre重組酶的條件下不表達；Stk11也需要Cre的存在才能發(fā)生敲除。因此，使用AAV-CRE對小鼠進行誘導(dǎo)，即可使其產(chǎn)生腫瘤。

驗證數(shù)據(jù)：

圖1 Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D原發(fā)肺癌小鼠模型可通過AAV-CRE誘導(dǎo)引發(fā)肺癌。

圖2. Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D瘤塊來源細胞系皮下移植造模的抗腫瘤藥效評價。

圖3. Stk11/EGFP/Kras-LSL-G12D瘤塊來源細胞系原位移植造模的抗腫瘤藥效評價。

品系簡稱：Trp53-Flox/Kras-LSL-G12D

品系目錄號：NM-CKO-233079

相關(guān)基因：Trp53/Kras-LSL-G12D

小鼠背景：C57BL/6

Trp53-Flox/Kras-LSL-G12D小鼠是一種原發(fā)肺癌小鼠模型，包含了Kras基因G12D突變與Trp53蛋白缺失。編碼腫瘤抑制因子Trp53在絕大多數(shù)小細胞肺癌（SCLC）腫瘤中失活。野生型Kras激活/失活效應(yīng)是受控的，而突變型Kras蛋白功能異常，持續(xù)處于激活狀態(tài)，導(dǎo)致腫瘤細胞的持續(xù)增殖。相似的，通過使用AAV-CRE對小鼠進行誘導(dǎo)，可使該模型小鼠產(chǎn)生腫瘤。

驗證數(shù)據(jù)：

圖4. Trp53-Flox/Kras-LSL-G12D原發(fā)肺癌小鼠模型可通過AAV-CRE誘導(dǎo)引發(fā)肺癌。

品系簡稱：Mki67-tdTomato-2A-Luc

品系目錄號：NM-KI-200223

相關(guān)基因：Ki67

小鼠背景：C57BL/6

Ki67蛋白被廣泛用作腫瘤標志物，并且 Ki67指數(shù)與腫瘤疾病的病程相關(guān)，可用于評估患者生存和癌癥進展。南模生物將Mki67-tdTomato-2A-Luc小鼠與Kras-LSL-G12D小鼠進行交配，并通過AAV-CRE注射誘導(dǎo)該小鼠模型形成腫瘤。

驗證數(shù)據(jù)：

圖5. Mki67-tdTomato-2A-Luc原發(fā)肺癌小鼠模型可通過AAV-CRE誘導(dǎo)引發(fā)肺癌。

原發(fā)胰腺癌小鼠模型

品系簡稱：KPC

品系目錄號：NM-KI-210096

相關(guān)基因：Trp53(R172H)/Pdx1/Kras(G12D)

小鼠背景：C57BL/6

KPC小鼠是目前成功建立的一種胰腺導(dǎo)管腺癌模型小鼠，具有很多與人胰腺癌相似的特點，如胰腺內(nèi)皮細胞瘤形成，強烈的免疫反應(yīng)等。80%的KPC小鼠出現(xiàn)了肝轉(zhuǎn)移和肺轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。KPC小鼠包含了Kras和Trp53基因突變；而在人胰腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，分別有80%和70%的患者表達這兩種突變蛋白。 KPC小鼠的p53基因含有一個顯性抑制性點突變（p53-R172H ），Kras基因含有一個條件性活化點突變（Kras-G12D）。模型中，Kras突變基因的上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，其在沒有Cre重組酶的條件下是不表達的。將Cre重組酶連接到Pdx1的啟動子后，其將在胰腺的腺泡、胰島和導(dǎo)管中表達。

驗證數(shù)據(jù)：

圖6. KPC小鼠模型的自發(fā)式性胰腺癌體和HE染色結(jié)果。胰腺表面不平整，多個結(jié)節(jié)狀突起；細胞排列無序，組織結(jié)構(gòu)呈不規(guī)則細胞團，可見胰腺導(dǎo)管增生，炎癥細胞浸潤，間質(zhì)纖維形成，符合腫瘤組織結(jié)構(gòu)特征。

圖7. KPC-luc原位移植小鼠模型。KPC小鼠腫瘤細胞接種至野生C57BL/6小鼠的肝臟、肺、胰腺中的生長情況。

圖8. KPC-luc皮下移植小鼠模型與藥效檢測。KPC小鼠瘤塊來源的細胞系的抗腫瘤藥效評價（宿主小鼠對為C57BL/6小鼠）。a. 藥效成瘤曲線, b. 藥效體重曲線, c. 腫瘤照片

品系簡稱：Cdkn2a-Flox/Kras-LSL-G12D/Pdx1-Cre-Tg

品系目錄號：NM-XA-234942

相關(guān)基因：Cdkn2a/Pdx1/Kras(G12D)

小鼠背景：C57BL/6

Cdkn2a/Kras-G12D/Pdx1小鼠是一種胰腺導(dǎo)管腺癌模型小鼠，可以很好地反饋侵襲性胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）之前的胰腺癌前病變等。Cdkn2a/Kras-G12D/Pdx1小鼠包含了Kras基因突變與Cdkn2a缺失。92%的人類PDAC檢測到KRAS突變，而CDKN2A的缺失是散發(fā)性PDAC中的關(guān)鍵致癌事件之一。該模型Kras突變基因的上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，其在沒有Cre重組酶的條件下是不表達的；Cdkn2a也需要Cre的存在才能發(fā)生敲除。將Cre重組酶連接到Pdx1的啟動子后，其將在胰腺的腺泡、胰島和導(dǎo)管中表達。

驗證數(shù)據(jù)：

圖9. Cdkn2a/Kras-G12D/Pdx1原發(fā)胰腺癌小鼠模型的胰腺癌成瘤率、生存率、體重變化率。

原發(fā)肝癌小鼠模型

品系簡稱：Alb-Cre-Tg/H11-CAG-LSL-Myc

品系目錄號：NM-KI-220458

相關(guān)基因：Alb/Myc

小鼠背景：C57BL/6

MYC是一種主要的致癌轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)參與細胞增殖、代謝和免疫逃避等多種途徑的靶基因，在多種癌癥的腫瘤發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在肝癌中，MYC及其信號通路發(fā)生顯著變化，對肝癌進展產(chǎn)生深遠影響，包括腫瘤增殖、轉(zhuǎn)移、去分化、代謝、免疫微環(huán)境和綜合治療耐藥等。這使得MYC成為一個有吸引力的靶點。該模型中Myc基因的上游含有l(wèi)ox-stop-lox終止序列，其在沒有Cre重組酶的條件下是不表達的，將Cre重組酶連接到Alb的啟動子后，其將在肝臟中表達。

驗證數(shù)據(jù)：

圖10. H11-LSL-Myc/Rosa26-LSL-LuC-EGFP/Alb-Cre三陽性小鼠自發(fā)肝癌瘤塊的同種移植實驗。

基于基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型原代腫瘤細胞系

基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與人類相似，但腫瘤的發(fā)生參差不齊，周期長，實驗耗費大。因而，南模生物從小鼠原發(fā)腫瘤建立起多種可在體外培養(yǎng)傳代的腫瘤細胞系，這些腫瘤細胞系不僅為癌細胞的體外生物學(xué)研究提供了工具，而且可以移植到遺傳背景相同、不會發(fā)生免疫排斥的其他小鼠體內(nèi)，建立移植瘤小鼠模型。

綜上，基因修飾原發(fā)腫瘤小鼠模型在腫瘤學(xué)研究中扮演著重要角色，尤其是在探索腫瘤的發(fā)病機制、藥物篩選和個性化治療方面具有廣泛的應(yīng)用前景。如您有相關(guān)小鼠模型或定制化服務(wù)需求，歡迎隨時聯(lián)系我們！