腫瘤研究工具庫(kù)不夠？細(xì)胞系定制來(lái)解憂
人體內(nèi)由于細(xì)胞分裂失控從而無(wú)限增殖的細(xì)胞被稱(chēng)為腫瘤細(xì)胞，具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤被稱(chēng)為惡性腫瘤，又稱(chēng)為癌（Cancer）。自人類(lèi)第一次成功從名為Hela的癌癥患者身上分離出Hela細(xì)胞，并在體外培養(yǎng)成功過(guò)后，腫瘤細(xì)胞就作為一種高通量的抗腫瘤篩選體系，一直被廣泛應(yīng)用于腫瘤研究，成為便捷高效經(jīng)濟(jì)的醫(yī)學(xué)研究工具。
腫瘤細(xì)胞在實(shí)驗(yàn)研究主要有以下幾種類(lèi)型：腫瘤原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞系/株。
腫瘤原代細(xì)胞一般是指直接從機(jī)體取出的組織(如人、小鼠或大鼠等組織)獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞，稱(chēng)為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。
而細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體，也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。
為更加切合目前研究需求，科學(xué)家們還會(huì)進(jìn)一步對(duì)細(xì)胞系進(jìn)行基因改造，構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。
南模生物細(xì)胞系構(gòu)建平臺(tái)由多位經(jīng)驗(yàn)豐富的專(zhuān)家領(lǐng)銜，擁有多年基因編輯的豐富經(jīng)驗(yàn)，可提供包括基因敲除、定點(diǎn)敲入、過(guò)表達(dá)、點(diǎn)突變等多樣化的細(xì)胞系定制服務(wù)。
服務(wù)案例
熒光敲入細(xì)胞系
圖1. Hela-HIST1H1C-mtagBFP2/TUBB-mNeonGreen雙熒光標(biāo)記細(xì)胞系的構(gòu)建。A-B.雙熒光標(biāo)記細(xì)胞系構(gòu)建策略。TUBB基因編碼B微管蛋白，是微管結(jié)構(gòu)的重要組成部分，通過(guò)將mNeonGreen熒光蛋白和TUBB融合，可以對(duì)細(xì)胞內(nèi)微管進(jìn)行定位;HIST1H1C基因編碼組蛋白H1C，在組蛋白與DNA結(jié)合形成核小體過(guò)程中發(fā)揮重要作用，定位在細(xì)胞核中，通過(guò)將mtagBFP2與HIST1H1C融合，可對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行標(biāo)記。C-D. Hela-HIST1H1C-mtagBFP2/TUBB-mNeonGreen雙熒光標(biāo)記細(xì)胞系mtagBFP2和mNeonGreen熒光表達(dá)照片。
基因敲除細(xì)胞系
圖2.MC38?Ccl5基因敲除細(xì)胞系的構(gòu)建。A,細(xì)胞系構(gòu)建策略;B.ELISA檢測(cè)MC38?Ccl5基因敲除細(xì)胞系Ccl5表達(dá)。
WT：MC38野生型細(xì)胞株；A1.A7.B5.：Ccl5基因敲除細(xì)胞株。
靶點(diǎn)人源化細(xì)胞系成瘤及藥效評(píng)價(jià)示例
圖3.?MC38-hNECTIN4人源化細(xì)胞系構(gòu)建及該細(xì)胞系在NECTIN4 ADC藥物與Keytruda聯(lián)用的體內(nèi)藥效結(jié)果。A.?NECTIN4靶點(diǎn)人源化細(xì)胞系 （MC38-hNECTIN4）構(gòu)建策路；B. FACS檢測(cè)MC38-hNECTIN4人源化細(xì)胞系中人源NECTIN4表達(dá)；C-D. NECTIN4ADC藥物與Keytruda聯(lián)用針列MC38-hNECTIN4細(xì)胞系的體內(nèi)藥效結(jié)果（1×106的MC38-hNECTIN4細(xì)胞接種于PD-1人源化小鼠(NM-HU-00015)皮下，待腫瘤生長(zhǎng)至約10m3開(kāi)始給藥），C為腫瘤生長(zhǎng)體積變化曲線，D為小鼠體重變化曲線。
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Cre-ERT2在無(wú)Tamoxifen誘導(dǎo)的情況下，在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)處于無(wú)活性狀態(tài)；當(dāng)Tamoxifen誘導(dǎo)后，Tamoxifen的代謝產(chǎn)物4-OHT（雌激素類(lèi)似物）與ERT結(jié)合，可使Cre-ERT2進(jìn)核發(fā)揮Cre重組酶活性。
查看常見(jiàn)的基因工程小鼠可以分為兩種命名方式，包括基因定點(diǎn)修飾的小鼠命名，比如：敲除、敲入、點(diǎn)突變等等，和隨機(jī)轉(zhuǎn)基因的小鼠命名。
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