科研的路，是一條漫漫長(zhǎng)路，需要不斷地學(xué)習(xí)與探索。在這期間，經(jīng)常會(huì)涉及一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，小鼠是最常使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。那對(duì)于一只從未接觸過(guò)小鼠的實(shí)驗(yàn)小白來(lái)說(shuō)，有一些功課是必須要提前完成的。

接下來(lái)以一問(wèn)一答的形式為大家介紹幾點(diǎn)小鼠相關(guān)的基本知識(shí)，同時(shí)貼心的小編也已將這些知識(shí)點(diǎn)整理歸類，印制在《小鼠飼養(yǎng)繁育科普知識(shí)》海報(bào)上，若想申領(lǐng)海報(bào)，可在文末免費(fèi)獲得。

常見近交系小鼠品系有哪些？我的實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇何種背景小鼠？

主要包括有C57BL/6 、BALB/c、FVB等

(1) C57BL/6?小鼠也叫Black 6 (B6)、C57 或C57 Black 6，是使用最為廣泛的近交系小鼠。毛色為黑色，是目前基因工程小鼠模型、人類疾病小鼠模型、自發(fā)或誘導(dǎo)突變品系最常用的遺傳背景。

(2) BALB/c 小鼠毛色為白色，被大家熟知主要是由于其在單克隆抗體與免疫學(xué)研究中的貢獻(xiàn)。BALB/c小鼠對(duì)放射線極為敏感。乳腺癌發(fā)病率低，但隨著年齡增長(zhǎng)，患其他癌癥（如肺癌和腎癌）的幾率大為增加。

(3) FVB 小鼠毛色白色，起源于Swiss 小鼠。該小鼠受精卵有大而顯著的原核，常用于顯微注射，另外還具有繁殖能力強(qiáng)、產(chǎn)仔數(shù)多的特點(diǎn)。FVB 小鼠自發(fā)腫瘤率低，但化學(xué)誘導(dǎo)后易發(fā)鱗狀細(xì)胞癌。

常見實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為幾級(jí)？

根據(jù)國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)的《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理?xiàng)l例》，按照相應(yīng)的微生物控制標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí)：一級(jí)，普通級(jí)動(dòng)物；二級(jí)，清潔級(jí)動(dòng)物；三級(jí)，無(wú)特定病原體級(jí)動(dòng)物；四級(jí)，無(wú)菌級(jí)動(dòng)物。

(1)?普通級(jí)動(dòng)物 conventional (CV) animal：不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病的病原。簡(jiǎn)稱普通動(dòng)物。?

(2)?清潔級(jí)動(dòng)物 clean (CL) animal：除普通級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶對(duì)動(dòng)物危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾大的病原。簡(jiǎn)稱清潔動(dòng)物。

(3)?無(wú)特定病原體級(jí)動(dòng)物 specific pathogen free (SPF) animal：除清潔動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。簡(jiǎn)稱為SPF動(dòng)物。

(4)?無(wú)菌級(jí)動(dòng)物 germ free (GF) animal：動(dòng)物體內(nèi)、外無(wú)可檢出的一切生命體的動(dòng)物。簡(jiǎn)稱為無(wú)菌動(dòng)物。

小鼠編號(hào)標(biāo)記的方法有哪些？

(1) 斷趾編號(hào)法：斷趾法是最常見的編號(hào)方法，根據(jù)對(duì)新生小鼠前肢 4 趾，后肢 5 趾的切斷位置來(lái)進(jìn)行編號(hào)。斷趾時(shí)，應(yīng)切斷其 1 段趾骨，不能只斷趾尖，防止傷口痊愈后辨別不清楚，此法常用于出生 7 天內(nèi)的小鼠。

(2) 耳標(biāo)法：用專門的耳孔機(jī)在小鼠耳朵上打孔或造成缺口，或者用剪刀在耳朵邊緣剪出不同的缺口進(jìn)行編號(hào)。打孔后必須用消毒過(guò)的滑石粉抹在打孔局部，以免傷口愈合過(guò)程中將耳孔閉合。

(3)?染色法：用毛筆或棉簽蘸取化學(xué)藥品，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體表不同部位涂上斑點(diǎn)，以示不同編號(hào)。常用染液有：3–5% 的苦味酸溶液（黃色）；0.5% 的中性品紅溶液（紅色）；2% 的硝酸銀溶液（咖啡色）。

如何觀察小鼠是否有疼痛？

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的狀態(tài)息息相關(guān)，如果實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本生活需求不能被滿足，使它們生活在痛苦的應(yīng)激狀態(tài)下，那么它們?cè)趯?shí)驗(yàn)中就會(huì)有不正常的反應(yīng)，研究人員得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果就不能保證準(zhǔn)確可靠。

以下疼痛識(shí)別和止痛措施供參考：

我的小鼠是否懷孕，多久生崽，是雄是雌呢？

性成熟周齡：6-8周

平均發(fā)情周期：4-5天；發(fā)情時(shí)間大約20h；分娩后20h開始發(fā)情

懷孕和斷奶時(shí)間（品系依賴）：懷孕19-21天；出生后20-21天斷奶

性別判斷：雄性小鼠生殖器與肛門之間的距離是雌性小鼠的2倍

小鼠檢栓：陰道栓常視為交配成功的標(biāo)志。雌鼠交配后10-12h，在陰道內(nèi)會(huì)形成一個(gè)白色的陰道栓，這是受孕的標(biāo)志。通常下午合籠，第二天早晨或上午檢栓。（注意：見栓不等于懷孕，不見栓也不等于未懷孕）

基因工程小鼠拿到后，如何設(shè)計(jì)繁育策略，快速得到實(shí)驗(yàn)用鼠？

（1） 轉(zhuǎn)基因小鼠?

轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性小鼠與野生型小鼠交配：TG × WT

（2）基因敲除/敲入?

雜合子與雜合子交配，獲得純合子：+/-?× +/- → -/-

對(duì)于ES細(xì)胞打靶途徑獲得的小鼠：

對(duì)于CRISPR/Cas9途徑獲得的小鼠：

（3）條件性基因敲除

獲得 flox 純合同時(shí) Cre 陽(yáng)性的小鼠：（f/+;Cre-）×（f/+;Cre+）→f/f;Cre+

這樣最終可以獲得 1/8的 flox 純合且?guī)в?Cre 的條件性基因敲除小鼠（f/f;Cre+）。如果覺(jué)得效率過(guò)低，也可以在繁育 f/+;Cre+?的同時(shí)，繁育 flox 純合子（f/f），再將這兩種小鼠相互交配。這樣，就可以獲得 1/4 的 f/f;Cre+ 敲除小鼠啦。

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你是不是跟著小編在回答每個(gè)問(wèn)題呢？有些問(wèn)題看似簡(jiǎn)單，但想要完全掌握，還真得花點(diǎn)時(shí)間和精力。文章開頭提到的《小鼠飼養(yǎng)繁育科普知識(shí)》海報(bào)，簡(jiǎn)短的文字配清晰的圖片，通俗易懂，貼在動(dòng)物房或?qū)嶒?yàn)室墻壁上，不經(jīng)意間便輕松記憶。