MDA-MB-231-Luc?是來源于人乳腺癌細胞，經(jīng)含 Luciferase 病毒轉染后，形成的具有 Luciferase 熒光素酶的穩(wěn)轉株。

·?皮下成瘤檢測，表明該細胞系在 M-NSG 小鼠皮下能正常成瘤。

·?在 M-NSG 小鼠股骨位接種成瘤，結果顯示體內 Luciferase?熒光信號穩(wěn)定上升。

·?在 M-NSG 小鼠乳房脂肪墊接種能成瘤，且切除原位腫瘤后，發(fā)現(xiàn)能發(fā)生轉移，其轉移部位大部分聚集在肝臟部位。

·?在 M-NSG?和 Balb/C?nude小鼠頸動脈注射后，均能形成腦轉移，且腦部Luciferase 熒光信號有明顯增長。

一、細胞形態(tài)

在10倍倒置顯微鏡下觀察，該細胞系的形態(tài)如下圖所示：

圖一、 MDA-MB-231-Luc?細胞形態(tài)圖

二、細胞 Luciferase 活性檢測

常規(guī)對構建的穩(wěn)轉株細胞進行 Luciferase?活性檢測，結果如下圖所示：

圖二、 MDA-MB-231-Luc?細胞 Luciferase 活性檢測

三、細胞皮下成瘤性驗證

為驗證?MDA-MB-231-Luc?細胞系能否實現(xiàn)皮下成瘤，我們設計了在 M-NSG??小鼠皮下接種較高劑量的 MDA-MB-231-Luc?細胞，如下圖所示：

圖三、（A） MDA-MB-231-Luc?細胞系在 M-NSG 小鼠中的成瘤曲線。（B）小鼠體重變化趨勢。 （C）小鼠生存曲線。(n=9)

四、細胞股骨位接種成瘤性驗證

為驗證 MDA-MB-231-Luc 能否在股骨處成瘤，我們從股動脈注射一定劑量的該細胞。

（一）小鼠體內 Luciferase 熒光信號變化

在實驗過程中持續(xù)規(guī)律性檢測小鼠股骨處仰臥位和俯臥位 Luciferase 熒光信號，結果分別如圖所示：

圖四、（A）仰臥位 Luciferase?熒光信號變化曲線圖 （B）俯臥位?Luciferase?熒光信號變化曲線圖 (n=4~5)

（二）小鼠體重變化趨勢和生存曲線

圖五、（A）各組小鼠體重變化趨勢 (n=4~5)

? ? ? ? ? ?（B）各組小鼠生存曲線圖 (n=4~5)?

（三）小鼠活體成像圖

不同時間點仰臥位和俯臥位小鼠的活體成像圖，如下圖所示：

圖六、不同時間點仰臥位和俯臥位小鼠活體成像圖

五、細胞乳房脂肪墊接種成瘤性與轉移性驗證

在?M-NSG 小鼠乳房脂肪墊接種成瘤實驗，兩個乳房墊部位接種相同劑量的MDA-MB-231-Luc?細胞。結果顯示MDA-MB-231-Luc?細胞在?M-NSG 小鼠乳房脂肪墊接種能成瘤，且接種后發(fā)現(xiàn)其能發(fā)生轉移，其轉移部位大部分聚集在肝臟部位。

（一）M-NSG 小鼠乳房脂肪墊接種成瘤

圖七、MDA-MB-231-Luc?細胞在乳房墊部位的成瘤曲線圖 (n=5)

（二）小鼠體內 Luciferase 熒光信號變化

在測量腫瘤的同時，我們也檢測了兩個乳房墊部位的 Luciferase?熒光信號，結果如下圖所示：

圖八、接種的兩個乳房墊部位 Luciferase?熒光信號變化曲線圖 (n=5)

（三）乳房墊部位小鼠活體成像圖

為了進一步直觀的觀察出接種的乳房墊部位的熒光反應情況，我們設計了在不同時間點對小鼠進行活體成像拍攝，如下圖所示：

圖九、不同時間點乳房墊部位的小鼠活體成像圖

（四）乳房墊部接種后小鼠生存曲線

圖十、乳房墊部位接種后的小鼠生存曲線 (n=5)

（五）乳房墊腫瘤切除后腫瘤發(fā)生轉移的小鼠體內 Luciferase 熒光信號變化

為了驗證在脂肪墊成瘤后把腫瘤切除能否形成轉移，我們在切除腫瘤后，對小鼠進行了熒光收集和活體成像，其熒光信號變化如下圖所示：

圖十一、腫瘤切除后發(fā)生轉移的小鼠體內 Luciferase?熒光信號變化曲線圖 (n=3-4)

（六）乳房墊腫瘤切除后腫瘤發(fā)生轉移的小鼠活體成像圖

為了進一步直觀的觀察出腫瘤切除后腫瘤轉移情況，我們設計了在不同時間點對小鼠進行活體成像拍攝，發(fā)現(xiàn)其發(fā)生了轉移，且主要集中在肝臟，如下圖所示：

圖十二、腫瘤切除后的小鼠活體成像圖

六、細胞頸動脈接種及腦轉移性驗證

為了驗證 MDA-MB-231-Luc 細胞能否形成腦轉移，我們分別對 M-NSG 和 Balb/c nude?小鼠進行頸動脈接種，并采集小鼠腦部的熒光信號。

（一）小鼠頸動脈接種后體內Luciferase 熒光信號變化

圖十三、MDA-MB-231-Luc ?細胞腦轉移后其在腦部 Luciferase?熒光信號變化

（A）M-NSG?小鼠頸動脈接種 MDA-MB-231-Luc?細胞 (n=3)；

（B）Balb/c nude 小鼠頸動脈接種 MDA-MB-231-Luc?細胞 (n=5)。

（二）小鼠生存曲線

圖十四、小鼠生存曲線

（A）M-NSG?小鼠頸動脈接種 MDA-MB-231-Luc?細胞 (n=3)；

（B）Balb/c nude 小鼠頸動脈接種 MDA-MB-231-Luc?細胞 (n=5)。

（三）小鼠頸動脈接種后腦部活體成像圖

圖十五、不同時間點小鼠腦部活體成像圖